德國**微生物快速系統(tǒng)診斷 RVL@產(chǎn)品 Q&A
1. 微生物檢測瓶除可以檢測活菌外，死菌可以檢測么？
答：不能檢測死菌。
2. 微生物檢測瓶可以檢測***么？
答：檢測瓶的檢測范圍即包括***（亞硫酸鹽梭狀芽胞桿菌 Sulphite reducing Clostridia，產(chǎn)氣莢膜桿菌 Clostridium perfrigens），也包括需氧菌。
檢測不同種微類生物的檢測瓶中試劑不同。對于***，我們有特殊的試劑，如檢測產(chǎn)氣莢膜桿菌 Clostridium perfrigens。
3. 檢測瓶的檢測原理都分別用到了哪些檢測方法？
答：培養(yǎng)皿法、酶法、**法、基因法等。
4. 對于第 3 題，你能簡要敘述這些方法的優(yōu)劣勢么？
答：與傳統(tǒng)的培養(yǎng)基法、膠體金、酶免法和 PCR 法不同，德國**微生物快速檢測系統(tǒng)檢測儀是多種方法的集合。單獨使用一種檢測方法都有自己的缺點，比如：
PCR 法需要專業(yè)技術(shù)人員和昂貴設(shè)備； 培養(yǎng)基法操作復(fù)雜；
膠體金法靈敏度低；
酶免法特異性捕捉不充分。
德國**微生物檢測瓶快速檢測系列產(chǎn)品是以上多種方法的綜合運用，吸收了每種方法的優(yōu)點，彌補了各種方法的不足。
5. 用微生物檢測瓶進行微生物檢測時，**步是先放樣本還是無菌水？
答：都可以。
6. 對樣本進行微生物接種時，需要在無菌環(huán)境下進行么？
答：檢測瓶是通過捕捉特異性，結(jié)合多種檢測法進行分析。無菌環(huán)境與否均可（臨檢的場所大都是非無菌環(huán)境）。
7. 檢測瓶可以檢測表面樣本和固態(tài)樣本么？
答：可以檢測固態(tài)、液態(tài)、表面樣本（用所配棉棒沾濕無菌水后涂抹表面）。紙漿等膏狀、糊狀、粘稠狀昂本都可以檢測。
8. 檢測瓶在檢測固態(tài)樣本時需要對進行研磨、稀釋等前處理過程么？
答：直接將樣本放入檢測瓶，無需任何前處理。
9. 每次檢測的無菌水用量是多少？
答：一般是 11ml。如果是檢測液態(tài)樣本或水樣本，建議加樣 1ml，加無菌水 10ml。
10. 放入樣本和無菌水后，“搖勻使其充分溶解和混合”這一操作步驟，無論定性分析還是定量分析，都是必要的步驟么？
答：是的，搖勻無論是定性還是定量分析都是必要步驟。
11. 不同的微生物對應(yīng)的孵育溫度是一樣的么?請舉例說明。
答：不一樣。37 攝氏度居多：活菌總數(shù)、沙門氏菌、李斯特菌等，大腸桿菌 44 攝氏度等，詳細請參考對照表。
12. 若是檢測冷菜或者冰欺凌這樣的樣本，孵育是否應(yīng)該低溫進行？
答：對檢測樣本自身的溫度沒有限制，檢測樣本中微生物，請嚴格遵照所檢測微生物對應(yīng)的孵育溫度，依然根據(jù)對照表。
13. 如果想加快檢測時間，孵育溫度可以調(diào)至高于所檢測微生物對應(yīng)的孵育溫度？
答：不可以，嚴格遵照對照表。
14. 操作手冊規(guī)定放入的樣本量為多少？
答：0.1g‐1.0g 或 0.1ml‐1.0ml。
15. 若放入的樣本量高于規(guī)定的樣本量，檢測結(jié)果會不同，或者檢測結(jié)果（定量時）增加么？
答：樣本量多一些或少一些，定量分析結(jié)果不會有變化。
原因：傳統(tǒng)的微生物學(xué)檢測方法，包括官方參考方法，即基于固體選擇性培養(yǎng)基的菌落計數(shù)法內(nèi)在的統(tǒng)計分散度（統(tǒng)計名詞，也稱為統(tǒng)計變異，是變量或概率分布蔓延，常見的例子是方差，標準差和四分位距。）大于 50%。很多實驗室已經(jīng)證實**生物檢測法與其他檢測方法比統(tǒng)計分散度低，可信度高。但不管怎樣，25‐30%的統(tǒng)計分散度還是有的。另外，由采樣產(chǎn)生的統(tǒng)計分散度同樣應(yīng)該考慮在
內(nèi)，尤其是微生物經(jīng)常容易繁殖的固態(tài)的肉制品類。
因此，加樣是 0.5g 或 1.5g 所得的結(jié)果在統(tǒng)計上是等價的（和其他任何方法獲得的結(jié)果相等）。
16. 對于面粉這類低密度的散裝樣本，可以照常檢測么？
答：可以。
17. 對于醬油這樣的深色樣本，會影響定性檢測結(jié)果的判讀么？您有什么好的建議？
答：如果搭配檢測儀進行定量分析，不存在這個問題；如果只是通過肉眼觀察變色進行定性分析，深色樣本如果擔心肉眼不能夠清晰的辨認，建議進行稀釋后再進行檢測。還記得第 15 題得答案么？加樣是 0.5g 或 1.5g 所得的結(jié)果在統(tǒng)計上是等價的和其他任何方法獲得的結(jié)果相等）。稀釋同樣的道理。
18. 如果是檢測水樣，還需要加入無菌水么？加多少？
答：建議加水樣 1ml，無菌水 10ml。
19. 不同的微生物對應(yīng)的開始顏色和呈陽性的顏色都相同么？請舉例說明。
答：不同。
例如，沙門氏菌孵育 10 分鐘左右出現(xiàn)的開始顏色為紅色，陽性顏色為黃色；李斯特菌，開始顏色為藍色，陽性顏色為黃色（具體請參考對照表）。
20．德國**微生物快速檢測系統(tǒng)檢測儀兼?zhèn)浞跤龣C的功能么？
答：是的。將檢測瓶充分搖勻后立即放入檢測儀，在軟件上進行檢測菌類設(shè)置后。
檢測儀會自動進行孵育，并自動給出定量分析檢測報告。
21. 微生物檢測儀兼?zhèn)湔袷幤鞯墓δ苊矗?/span>
答：不具備。需用手用力搖 2‐3 分鐘，或振蕩器搖 20 秒左右，直至充分溶解或混合。
22. 微生物檢測儀的判讀原理是什么？
答：微生物檢測儀是一款精密的光學(xué)判讀儀。通過光學(xué)原理精密探測檢測瓶中的顏色變化，并給出**的定量分析檢測報告。
23. 微生物檢測儀是外接電源，還是自帶充電電池？
答：微生物檢測儀目前是外接電源,以后也許會開發(fā)便攜式電源。
24. 微生物檢測儀可以同時、獨立地檢測多少個檢測瓶？
答：8 個。同時、獨立的探測，并分別給出定量分析報告。
25. 微生物檢測儀定量分析，需要在電腦上安裝分析軟件么？
答：需要按照配套分析軟件。
26. 怎樣的計算機操作系統(tǒng)對德國**微生物快速檢測系統(tǒng)分析軟件兼容？
答：XP, Vista, Windows 7
27. 如果檢測儀是初次開機，接通電源后需要稍等多少時間再進行下一步操作？
答：若初次開機，開機后停留 40 秒左右繼續(xù)操作為宜。
28. 檢測儀進行定量分析時，充分混合后的檢測瓶是應(yīng)該立即放入檢測儀，還是稍等片刻后再放入？
答：充分混合后立即放入檢測儀。
29. 檢測瓶放入檢測儀后，在檢測儀分析軟件點擊開始，軟件界面上對應(yīng)檢測孔的燈會變成什么顏色？
答：在所檢測檢測瓶對應(yīng)的操作界面上點擊“Start”（開始），對應(yīng)孔的指示燈由綠色變?yōu)榧t色。表明檢測開始并進行中。
30. 當檢測結(jié)束后，分析軟件界面對應(yīng)孔的燈光會恢復(fù)為什么顏色，說明檢測結(jié)束，可以放入新樣本?
答：在檢測進行時，指示燈為紅色。當檢測結(jié)束后，指示燈變?yōu)榫G色。此時在對應(yīng)的檢測儀檢測孔放入新的檢測瓶開始下一輪檢測是可以的。檢測時間由細菌的存在量決定（當微生物含量較高時），或由對照表對應(yīng)的檢測時長決定（當微生物含量很低時，應(yīng)超過對照表中檢測 1CFU 對應(yīng)的檢測時間）。
31. 微生物檢測瓶的分析時間和檢測瓶中微生物含量之間是什么關(guān)系？
答：反比關(guān)系。即微生物含量越多，對應(yīng)的檢測時間越短；微生物含量越少，對應(yīng)的檢測時間越長。 如果樣本中微生物含量過高，幾分鐘甚至幾秒鐘內(nèi)檢測儀的定量分析結(jié)果就會顯著變動；如果微生物含量很低，（由于 RVLM 是非常精密靈敏的儀器）有經(jīng)驗的使用中可以通過幾小時甚至幾分鐘的數(shù)據(jù)變化初步判斷微生物目標含量是否達到規(guī)定要求。
32. 分析檢測前是否應(yīng)該有明確的實驗?zāi)康囊源_定你要檢測的微生物含量（根據(jù)國家標準規(guī)定微生物的存在量。）？
答：這樣是*好的。
例如，根據(jù)國家 GB 標準，或根據(jù)國際 EC 標準等，都有明確（或部分明確）地注明微生物在不同家禽、畜牧物種中的允許*大存在量。
具體地說，在進行微生物檢測時，我們首先要明確檢測目的。如、國際 EC 2073:2005標準中規(guī)定，大腸桿菌在鮮肉中允許的*大存在量為 CFU 10^2/g，即每克鮮肉中大腸桿菌的含量不允許超過 CFU 10^2。此時我們根據(jù)對招表，找到大腸桿菌所在列，查 log CFU 10^2=2，即在大腸桿菌行中找到數(shù)字 2 所對應(yīng)**列的數(shù)字為 14。無論是肉眼進行定性分析，還是檢測儀進行定量分析，要檢測樣本中大腸桿菌含量是否超過 CFU 10^2，*長在 14 小時即可得到嚴格精準的分析結(jié)果。
如果是檢測瓶進行定量分析，有經(jīng)驗的實驗員會在很短時間內(nèi)（譬如十幾分鐘）根據(jù)定量分析數(shù)據(jù)的動態(tài)變化情況，初步判斷出檢測瓶中的微生物含量。
33. 明確要檢測微生物含量的目的是什么，對照表起到什么作用？
答：是確定所檢測微生物對應(yīng)的孵育溫度、開始顏色、分析時間、陽性顏色的標準對照的依據(jù)。具體的使用方法請參考上一題答案。
34. 什么是 CFU?
答：colony‐forming unit,菌落形成單位。
經(jīng)培養(yǎng)所得菌簇形成單位的英文縮寫。
細菌（可見）和**的測量單位。CFU:colony‐forming unit,菌落形成單位，將稀釋后的一定量的菌液通過澆注或涂布的方法，讓其內(nèi)的微生物單細胞一一分散在瓊脂平板上，待培養(yǎng)后，每一活細胞就形成一個菌落。與常規(guī)利用顯微鏡對微生物數(shù)量進行測量不同，主要是對可見（即多數(shù)情況下形成菌落）的細菌數(shù)量進行測量的單位。 意思就是每毫升菌液中含有多少單細胞！ 傳統(tǒng)上就叫“個”。但是，我們知道，一個菌落并不一定是一個細菌所生成，也可能是由一簇細菌（一個細菌團）所生成，這時候再叫“個”就不太準確啦，準確的叫法就是“菌落形成單位”，英文縮寫“CFU”。就像“公斤”和“千克”，只是叫法不同，數(shù)量上沒有變化。
CFU 代表“colony forming units”。CFU/mL 指的是每毫升樣品中含有的細菌群落總數(shù)，也有用 CFU/g 即對應(yīng)固體培養(yǎng)基。
35. 假如我要檢測樣本中大腸菌群的菌落含量不得超過106CFU/g 或 106CFU/ml，
用肉眼觀察瓶中顏色變化進行定性分析，請對照“孵育溫度和比色對照表”詳細敘述檢測步驟。
答：**步：放入樣本
放入所要檢測的樣本（0.1‐1.0g，或 0.1‐1.0ml），加入 11ml 無菌水（根據(jù)檢測物情況，若為液體，建議加樣 1ml，加無菌水 10ml。差別不大），蓋緊瓶蓋。
**步：搖動瓶子直到溶劑充分溶解或混合。
如果用手需有力搖 2‐3 分鐘左右；或用振蕩器搖，需時 20 秒左右。
第三步：在適當時間判讀檢測結(jié)果
(1)若肉眼定性分析。根據(jù)對照表確定大腸菌群對應(yīng)的孵育溫度、開始顏色、檢測時間、陽性顏色等信息。
孵育溫度：根據(jù)對照表為 37℃；
開始顏色：即搖勻后放入 37℃恒溫箱孵育 10 分鐘左右會呈現(xiàn)的顏色。根據(jù)對照表為紅色；
檢測時間：我們要檢測標準為大腸菌群含量不超過 106CFU/g 或 106CFU/ml。根據(jù)對照表，對應(yīng)列log 106=6，找數(shù)字 6 對應(yīng)行的數(shù)字為 6，即檢測時間為 6 小時。即，觀察時間確定為 6 小時。
陽性顏色：根據(jù)對照表，大腸菌群的陽性顏色為黃色。
確定了以下信息后，我們把充分混合后的檢測瓶放入 37℃恒溫箱，這樣一直放置。孵育 10 分鐘左右，我們觀察會發(fā)現(xiàn)檢測瓶會呈現(xiàn)檢測大腸菌群對應(yīng)的開始顏色——紅色。繼續(xù)放置，到 6 個小時的時候進行觀察，如果顏色變?yōu)辄S色，說明樣本中大腸菌群含量超過 106CFU/g 或 106CFU/ml，樣本為不合格品；若沒有變?yōu)辄S色，而是始終保持開始顏色紅色，或其他中間顏色，說明樣本中大腸菌群含量未超過 106CFU/g 或 106CFU/ml，樣本為合格品。
(2)若檢測儀進行定量分析
此步驟請參見下一題。
第四步：無菌處理
*后別忘記按下檢測瓶的瓶蓋上方對檢測瓶進行**處理。按下瓶蓋后搖一搖，好了，可以**丟棄了。
注意：在進行實驗操作時，不要碰到檢測瓶的瓶蓋頂部，以免在不當?shù)臅r候進行了無菌處理，影響試驗結(jié)果。
36. 若第 34 題搭配檢測儀進行**的定量分析，請詳述操作步驟。
答：(2)若檢測儀進行定量分析
將充分混合后的檢測瓶立即放入檢測儀。
啟動檢測儀軟件，點擊“Station”（狀態(tài)）錄入相關(guān)信息（包括：檢驗員姓名、檢測、檢測樣本所屬客戶、檢測時間等信息）；在軟件操作界面“analysis type”（檢測種類）下拉菜單中勾選所檢測的微生物種類，點擊 ok，點擊開始，指示燈變紅，
開始進入分析狀態(tài)。觀察檢測儀的定量分析數(shù)據(jù)變化，進行判斷。
37. 為什么在檢測結(jié)束之前，不能按下檢測瓶的瓶蓋？
答：無菌處理。瓶蓋中還有無菌處理物質(zhì)，按下瓶蓋，瓶蓋中的無菌處理物進入瓶內(nèi)，與瓶內(nèi)溶劑進行反應(yīng)，完成無菌處理。因此，實驗過程中請不要輕易觸碰檢測瓶的瓶蓋。
技術(shù)人員選答題，銷售人員必答題：
1. 檢測瓶可以檢測多少種微生物，分別是什么？
答：活菌總數(shù)、大腸菌群、大腸桿菌、腸道桿菌科、金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、沙門氏菌、李斯特菌、腸球菌、亞硫酸鹽還原梭狀芽孢桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、曲霉屬**、曲霉菌、酵母菌。
以后還有陸續(xù)有其他微生物菌種的檢測瓶相繼面世。包括軍團菌等。
2. 檢測瓶在檢測大腸桿菌時，可以檢測到所有的大腸桿菌菌株么（包括目前流行的 EHEC?）
答：是的，可以檢測到全部的大腸桿菌菌株，包括 EHEC 腸出血性大腸桿菌（E.coli O104, O111, O157 等）
3. 檢測瓶的應(yīng)用范圍有哪些？
答：衛(wèi)生控制：食品(HACCP)，廚房、工具、表面(HACCP)，水質(zhì)，(CDC)**控制、進出口檢驗檢疫、藥品及化妝品。
與我們生活息息相關(guān)的：環(huán)境監(jiān)測機構(gòu)，農(nóng)產(chǎn)品及相關(guān)加工公司，水源檢測和制水廠，水配送公司，藥廠、藥房、化妝品廠，分析實驗室和 HACCP 診斷，奶制品廠，咖啡館、餐廳，消費者保護團體、工商管理機構(gòu)，室內(nèi)空調(diào)調(diào)節(jié)公司，尤其能應(yīng)用于**、大型展會等的食品快速檢測。
4. 你認為大腸桿菌檢測瓶、李斯特菌檢測瓶、沙門氏菌檢測瓶除了是用于食品**檢測外，適用于醫(yī)療么？
答：大腸桿菌(EHEC)、李斯特菌、沙門氏菌，這三款檢測瓶可用于體外臨床檢測。
Royal 微生物檢測瓶系列的全球定位依然是食品**。在歐洲，對人體進行微生物的臨床體外檢測是非常少的，歐洲的各方面**控制的很好。然而，在發(fā)展中國家，以上三款微生物的人體體外臨床檢測經(jīng)常發(fā)生。而以上三款檢測瓶用于體外臨床檢測的**性和準確度都可以保證。
4 合 1 試紙片和檢測瓶市場定位的區(qū)別
1）4 合 1 試紙片和檢測瓶比較
? 4 合 1 試紙片配合其分析儀，一臺分析儀可以同時檢測 48 個試紙片。因此，從經(jīng)濟成本的角度考量，*好一開機就是 48 片同時檢查。對于醫(yī)院，攢夠 48個糞便樣本后，一次性進行分析。
檢測瓶，一個樣本就可以進行檢查。而且更大的優(yōu)勢在于，這款產(chǎn)品會非常受醫(yī)生的歡迎。因為醫(yī)生可以不用接觸樣本，這是目前大多數(shù)的醫(yī)院檢測無法做到的。把瓶子給病人，讓病人自己將糞便樣本放入后送回給醫(yī)生。醫(yī)生拿到檢測瓶，在醫(yī)院的振蕩器上搖勻后，放入孵育機，等待結(jié)果判讀即可。
2）檢測瓶與醫(yī)院目前傳統(tǒng)檢測法的比較
? 目前醫(yī)院的檢測方式依然是培養(yǎng)皿法居多。這種方法*令醫(yī)生反感的地方是醫(yī)生要接觸樣本。如果醫(yī)生處于懷孕期，接觸到李斯特菌的后果就是流產(chǎn)。如果檢測臺沒有處理干凈，也容易導(dǎo)致微生物的傳播。
? 檢測瓶，醫(yī)生完全不用接觸樣本。樣本放入檢測瓶的的這個過程交給病人在衛(wèi)生間去操作就可以。醫(yī)生要做的就是簡單的搖勻和放入孵育器孵育（振蕩器和孵育器都是醫(yī)院的常規(guī)設(shè)備）。
5. 無論固態(tài)、液態(tài)還是表面樣本，在檢測時是否都無需進行前處理？
答：是的
6. 德國**微生物快速檢測系統(tǒng)檢測儀的特異性是多少？
答：99.999%（理論極限值）
7. 檢測儀的靈敏度是多少？
答：可以檢測到 1 個活菌的理論極限值。
8. 做定性分析時，檢測需要幾步，分別是什么？
答：三步：加樣；搖動瓶子直到充分溶解和混合；在適當時間判讀結(jié)果（根據(jù)對照表）。*后不要忘記按下瓶蓋上方進行無菌處理。
9. 做定量分析時，檢測需要幾步，分別是什么？
答：同上。具體請參考檢測儀操作文檔。 。
10. 檢測后按下檢測瓶瓶蓋的目的是什么？
答：無菌處理，請參考上第 45 題。
11. 檢測瓶的儲存溫度是多少？
答：在 20℃-25℃左右既可以儲存，這個溫度下很方便運輸，對于臨檢來說是有利的。但隨著大氣溫室效應(yīng)，夏天時還是要注意儲存溫度不要超過 25℃，負責(zé)會影響檢測瓶檢測的靈敏度。然而，如果可以放到 4℃進行儲存，保質(zhì)期可以延長近一倍。
12. 如果預(yù)延長檢測瓶的有效期，儲存溫度*好為多少？
答：4℃，具體見下表。
